Evaluación In Vitro Del Potencial Osteogénico De Una Matriz De Fibrina Bioactiva Sobre Células Madre Mesenquimales De Origen Dental Estimuladas Con Láser De Baja Potencia

Los defectos óseos severos están asociados principalmente con accidentes en motocicletas y traumas ocasionados por hechos violentos o derivados del conflicto armado. El tratamiento en la mayoría de los casos es protésico, para restaurar o rehabilitar la función perdida. Actualmente se está trabajando en un manejo alternativo con terapias regenerativas que han demostrado ser eficaces, sin embargo, demandan un alto costo, y en muchos casos de acceso limitado para los pacientes. Esta situación requiere orientar recursos en investigación hacia el desarrollo de biomateriales y técnicas que garanticen una respuesta rápida, óptima, de bajo costo y fácil acceso tanto para pacientes como para clínicos. Recientemente se vienen utilizando concentrados plaquetarios autólogos, de fácil obtención bajo costo de elaboración, que demuestran mejorar los procesos de cicatrización y promover la regeneración. De igual forma se ha evidenciado que la terapia con láser de baja potencia estimula la proliferación celular. No se ha probado el uso conjunto de la fibrina autóloga y el láser de baja potencia sobre cultivos celulares. Objetivo. Evaluar el potencial osteogénico, in vitro, de una matriz de fibrina bioactiva autóloga sobre células madre mesenquimales de la papila apical estimuladas con láser de baja potencia. Materiales y Métodos. Se realizará un estudio experimental in vitro en cultivos de células madre mesenquimales de la papila apical previamente caracterizadas mediante citometría de flujo, a las cuales se le adicionará la membrana de fibrina autóloga y serán estimuladas con láser de baja potencia. Posteriormente se evaluará la presencia de marcadores asociados con regeneración ósea como fosfatasa alcalina intracelular (ALP), así como la expresión génica de los marcadores moleculares osteocalcina (Ocn), colágeno I (Col1) y osteopontina (Opn) por medio de PCR convencional. Resultados. Se espera determinar el potencial osteogénico de la fibrina rica en plaquetas, la terapia láser de baja potencia y su posible poder coadyuvante para promover eficientemente la regeneración ósea. El impacto del proyecto está en la medida que puede ser replicado clínicamente como una propuesta nueva de bajo costo y segura para regeneración tisular.

Severe bone defects are mainly associated with motorcycle accidents and traumas caused by violent events or those derived from the armed conflict. The treatment in most cases is prosthetic, to restore or rehabilitate the lost function. Work is currently underway on alternative management with regenerative therapies that have proven to be effective, however, they demand a high cost, and in many cases limited access for patients. This situation requires orienting resources in research towards the development of biomaterials and techniques that guarantee a rapid, optimal response, low cost and easy access for both patients and clinicians. Recently autologous platelet concentrates have been used, easy to obtain at low production cost, which demonstrate improved healing processes and promote regeneration. Similarly, it has been shown that low-power laser therapy stimulates cell proliferation. The combined use of autologous fibrin and low-power laser on cell cultures has not been proven. Objective. To evaluate the osteogenic potential, in vitro, of a matrix of autologous bioactive fibrin on mesenchymal stem cells of the apical papilla stimulated with low power laser. Materials and methods. An in vitro experimental study will be carried out on mesenchymal stem cell cultures of the apical papilla previously characterized by flow cytometry, to which the autologous fibrin membrane will be added and they will be stimulated with a low power laser. Subsequently, the presence of markers associated with bone regeneration such as intracellular alkaline phosphatase (ALP) will be evaluated, as well as the gene expression of the molecular markers osteocalcin (Ocn), collagen I (Col1) and osteopontin (Opn) by means of conventional PCR. Results It is expected to determine the osteogenic potential of platelet-rich fibrin, low-power laser therapy and its possible adjuvant power to efficiently promote bone regeneration. The impact of the project is to the extent that it can be clinically replicated as a new low-cost and safe proposal for tissue regeneration.

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